Нановолокна для изучения культуры клеток

Нанесение нановолокон на покровное стекло с помощью электроформования. ЭФ – широко применяемый способ получения нановолоконного материала для изучения поведения клеток на нановолокнистой поверхности.

Для формирования слоя нановолокон на покровном стекле понадобится установка для ЭФ, желательно с фильерой наверху, при этом формование волокон должно проходить в сторону коллектора. Тогда покровное стекло для сбора волокон можно разместить на пластине коллектора. В отличие от пластика, стекло обычно не отталкивает заряженные волокна, таким образом, ЭФ нановолокна будут осаждаться на покровном стекле. Однако поскольку лежащая внизу проводящая пластина притягивает заряженные волокна, важно расположить покровные стекла близко друг к другу, тогда большее число волокон осаждается на покровных стеклах, а не в пространстве между ними.

Схематическое изображение процесса электроформования,
демонстрирующее расположение покровных стекол для сбора нановолокон
(Благодарим сайт www.electrospintech.com за предоставленные изображения)

Удаление покровного стекла, покрытого нановолокном

Поскольку волокна наносятся на покровное стекло непрерывным слоем, следует обратить внимание, чтобы не произошло отделение слоев от покровного стекла. Необходимо с осторожностью использовать острое лезвие для отрезания слоя нановолокна по краям покровного стекла или использовать круглый штамп, больший по размеру, чем диаметр покровного стекла. 

Закрепление нановолокна на покровном стекле

Когда покровное стекло, покрытое нановолокном, опускается в соответствующую среду для выращивания клеток, нановолокнистый слой может начать отделяться от покровного стекла. Если это происходит, то для приклеивания нановолокнистого слоя по краям можно использовать фармацевтический или силиконовый гель. Чтобы вырастить клетки на покровном стекле, покрытом нановолокном, можно использовать нержавеющее стальное кольцо или клонзапирающее кольцо в качестве груза на покровном стекле, иначе оно будет плавать по поверхности среды.

Стерилизация
Существует несколько способов стерилизации подготовленных образцов. Один из способов – погружение образца в 70% этанол, с одновременным облучением его под УФ в течение 1 часа. Таким образом, волокна, которые не попадают под облучение, дезинфицируются с помощью этанола. Однако важно отметить, что под УФ  лучами происходит незначительная деструкция волокон (И.Донг и соавт., 2008). После извлечения образцов  из  этанола  их следует промыть  фосфатно-солевым буферным раствором, как минимум три раза, каждый раз образцы необходимо оставить на 5 минут, для полного удаления этанола.

 

Источник: http://electrospintech.com/

 

Яндекс.Метрика